103616-89-3 L-2-氯苯丙氨酸

干冰运输，危险性质非危险化学品。WGK Germany:3，海关编码:29224999。

L-2-氯苯丙氨酸是一种苯丙氨酸衍生物，主要应用于生命科学领域。

生命科学

合成路线（以2-氯肉桂酸为底物）

• 基因构建：根据Rhodosporidium toruloides ATCC 10788的PAL蛋白序列（NCBI编号CAA31209），由Genscript合成R. glutinis的PAL基因并优化密码子以适应大肠杆菌表达；将合成基因连接至pUC57载体的SmaI位点，构建pUC57_PAL质粒。
• 转化与发酵：5μg pUC57_PAL质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，经羧苄青霉素筛选后，28℃过夜培养；再接种至10L TB培养基（含100μg/ml羧苄青霉素和1mM IPTG），37℃搅拌发酵9.5小时（转速500-1500rpm），离心收集230g湿细胞（-20℃保存）。
• 酶催化反应：
  • 底物准备：1.8g（10mmol）3-(2-氯苯基)-丙烯酸溶于0.5L 13vol%氨水溶液，用25w/w% H₂SO₄调pH至11。
  • 细胞重悬：130g湿细胞重悬于0.2L pH11的13vol%氨水溶液中，与底物混合至总体积1L。
  • 反应条件：30℃、200rpm搅拌，初始1小时每5分钟补加0.91g（5mmol）底物，后续7小时每25分钟补加，总反应8.5小时。
• 产物分离：离心除细胞，上清液减压浓缩（150-10mbar，60℃）至去除65%水，过滤沉淀并水洗除盐，干燥得14.9g产物（含57% N-氨基-3-(2-氯苯基)-丙酸、24%水和1.7%未反应底物），HPLC测定产率91%，(S)-2-氨基-3-(2-氯苯基)-丙酸e.e.值99%。 参考文献：EP1676838（2006）；WO2006/69799（2006）；JACS 2015, 137, 12977-12983；Catalysis Science & Technology 2016, 6, 4086-4089。