化学合成。
化学合成
路线1：基于正丁基锂和N-氟苯磺酰亚胺（NFSI）的低温合成
- 原料：4-氯-3-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（0.6g，2.60mmol）、正丁基锂（nBuLi，1.6M己烷溶液，4.10mL）、N-氟苯磺酰亚胺（NFSI，3.38mmol，1.065g）、干燥四氢呋喃（THF）、乙酸乙酯（EtOAc）、饱和氯化铵溶液、无水硫酸镁（MgSO₄）、甲醇（MeOH）、二氯甲烷（CH₂Cl₂）
- 步骤：将原料溶于30mL干燥THF，冷却至-78℃，滴加nBuLi，-78℃搅拌20分钟；滴加溶于6.5mL无水THF的NFSI，升温至室温搅拌过夜；加水淬灭，蒸发至干；用EtOAc和饱和氯化铵溶液分配，萃取合并有机层，水洗，MgSO₄干燥，过滤蒸发；硅胶柱色谱纯化（4%MeOH/CH₂Cl₂洗脱）
- 收率：71%（0.36g）
- 表征：¹H NMR（DMSO）δ7.70（s，1H）、8.62（s，1H）、12.25（s，NH）
- 参考文献：WO2004/11478 A2（Page 27）；Journal of Medicinal Chemistry, 2004, 47(21):5284-5297；Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2012, 22(24):7742-7747；WO2015/143712 A1（Page/Column 34;35）；US2016/244475 A1（Paragraph 0310;0313）
路线2：基于Selectfluor的中高温合成（路线2）
- 原料：4-氯-7H-吡咯并嘧啶（5g，32.7mmol）、Selectfluor（17.35g，49mmol）、无水乙腈（250mL）、乙酸（ACOH，50mL）、甲苯、二氯甲烷（DCM）、乙酸乙酯（EtOAc）
- 条件：N₂保护下70℃加热14小时
- 步骤：原料与Selectfluor置于烧瓶，加乙腈和ACOH，70℃加热14小时；冷却后真空除溶剂，甲苯共蒸发；溶于DCM:EtOAc（1:1），硅胶垫过滤洗涤；柱色谱纯化（DCM:EtOAc=4:1洗脱）
- 收率：59%（3.3g）
- 表征：¹H NMR（DMSO-d₆）δ7.73（s，1H）、8.64（s，1H）、12.5（br s，1H）；¹³C NMR（DMSO-d₆）δ105.3（d，J=14.3Hz）、111.0（d，J=25.5Hz）、139.6（d，J=244.5Hz）、146.7（d，J=1.5Hz）、148.5（d，J=3.8Hz）、151.0；¹⁹F NMR（DMSO-D6）δ-170.7（d，J=1.6Hz）；MS（M+H）：172.0
- 参考文献：Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids, 2004, 23(1-2):161-170；WO2005/16878 A2（Page/Column 12）；Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2010, 20(24):7297-7298；EP2390254 A1（Page/Column 54）；Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2012, 22(5):2052-2062；Journal of the American Chemical Society, 2008, 130(41):13639-13648；WO2011/149827 A1（Page/Column 67）；US2016/244475 A1（Paragraph 0310;0311）；Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2016, 26(18):4518-4522；Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2010, 54(7):2932-2939；WO2011/146882 A1（Page/Column 111）；US2012/122838 A1（Page/Column 81）；Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2012, 22(24):7742-7747；WO2015/143712 A1；US2016/244475 A1
路线3：基于Selectfluor的延长时间高温合成
- 原料：4-氯-7H-吡咯并嘧啶、Selectfluor、乙酸、乙腈、甲苯、二氯甲烷（CH₂Cl₂）、乙酸乙酯（EtOAc）、甲醇（MeOH）
- 条件：70℃加热24小时（HPLC监测原料损失）
- 步骤：原料与Selectfluor在乙腈和乙酸中反应24小时；浓缩，甲苯共蒸发；硅藻土垫过滤（1:1 EtOAc/CH₂Cl₂洗涤）；硅胶柱色谱纯化（CH₂Cl₂/MeOH 0-10%梯度洗脱）；合并产物级分
- 收率：58%（1.93g）
- 表征：MS（ES）：m/z=172 [M+H]
- 参考文献：WO2008/140947 A1（Page/Column 36）；US2007/191293 A1（Page/Column 57）
