脱氧核苷酸

• 背景及概述 慢性乙型病毒性肝炎是临床常见的一种传染性疾病，具有传染性强、传播途径复杂、发病率高等特点，若不能进行有效的治疗，可发展成为肝硬化、肝癌，危及患者生命，危害极大。肝功能异常是慢性乙型病毒性肝炎的常见合并症，如何控制疾病发展，有效恢复肝功能，是目前临床治疗的热点话题。慢性乙肝治疗原则主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化和对症治疗，其中抗病毒治疗是关键，但缓解肝脏炎症、促进肝细胞再生及免疫调节治疗也是重要的。干扰素和核苷（酸）类似物是治疗慢性乙肝的两类一线药物，近年来随着新药的不断问世，治疗慢性乙肝有了新的选择。 脱氧核苷酸（Deoxyribonucleotide）是由含氮碱（嘌呤或嘧啶）、脱氧核糖和磷酸连接而成的化合物，是脱氧核糖核酸的组成单位，包括脱氧鸟苷酸、脱氧腺苷酸、脱氧胞苷酸和脱氧胸苷酸等四种。脱氧核苷酸钠注射液是以生物技术提取的脱氧核糖核酸为原料，经多种生物酶的作用而形成的，富含腺嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸胞嘧啶核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸等4种核苷酸成分，参与体内核酸代谢过程，对肝脏、心脏、血液系统、免疫系统等多器官、系统具有广泛的药理作用。临床报道，脱氧核苷酸、薄芝糖肽单独使用治疗慢性乙肝疗效与单独使用干扰素相当。核酸是维持正常细胞免疫所必需的营养物质，由于免疫系统没有从头合成途径合成核苷酸的能力，补充外源性核苷酸可有效地促进机体维持正常免疫功能。脱氧核苷酸钠具有调节外周淋巴细胞功能，促进淋巴细胞分泌白介素2和d干扰素；促进自然杀伤细胞的细胞杀伤作用，调节T细胞功能；增强单核细胞的趋化及吞噬作用等，该药物的作用机制表明该药物对肝有重要的意义。
• 性状 为无色或淡棕色澄清溶液，pH6.5～7.5.
• 药理作用 对于肝脏而言，脱氧核苷酸钠的主要作用有：①提高细胞酶活力和生物电活性，维持肝细胞膜稳定性，促进体内半胱氨酸 谷胱甘肽辅酶A等重要物质的合成，提高肝脏的解毒功能，促进肝功能恢复；②促进肝细胞DNA的合成和有丝分裂，提高肝细胞再生能力，提供代谢支持，维持肝内环境相对稳定，避免肝功能衰竭；③直接补充核苷酸，调动机体通过 补救合成途径合成核苷酸，减轻受损肝脏负担，有利于恢复肝脏功能 脱氧核苷酸钠对肝脏的这些药理作用，使得其在肝炎的治疗中得到广泛应用。 此外，脱氧核苷酸钠还具有调节机体免疫力的作用。脱氧核苷酸钠具有调节外周淋巴细胞功能，促进淋巴细胞分泌白介素2和d干扰素；促进自然杀伤细胞的细胞杀伤作用，调节T细胞功能；增强单核细胞的趋化及吞噬作用等。对肿瘤病患者，因应用抗癌药物或放射疗法引起骨髓抑制和其他原因引起的白细胞减少症有显著疗效；对血小板减少及肝炎等症有一定疗效。
• 合成路线 本品生产工艺包括制备5′-磷酸二酯酶、提取脱氧核糖核酸和脱氧核苷酸注射液三部分。 1.5′-磷酸二酯酶的制备 2. 脱氧核糖核酸的提取 3. 脱氧核苷酸注射液的制造
• 适应症 用于急、慢性肝炎，白细胞减少症，血小板减少症及再生障碍性贫血等的辅助治疗。
• 规格 本品为复方制剂，其组分为脱氧核糖胞嘧啶核苷酸、脱氧核糖腺嘌呤核苷酸、脱氧核糖胸腺嘧啶核苷酸及脱氧核糖鸟嘌呤核苷酸钠盐。每安瓿2mL，含脱氧核苷酸为50mg，氯化物含量不超过1%，无机磷不超过0.1%。重金属不超过10mg/kg。
• 用法用量 1.可肌肉注射，成人2～4mL/d，小儿酌减或遵医嘱。 2.静脉滴注：一次50～150mg（1～3支），一日1次，30天为一疗程。将本品加入到250ml的5%葡萄糖注射液中，缓慢滴注（每分钟2ml）。
• 不良反应 偶有一过性血压下降
• 注意事项
  1. 勿与其他注射液混用。
  2. 用于因放射、化学治疗后白细胞减少时，治疗过程中应定期监测血象，如果治疗期间粒细胞计数升到5000/mm3（WBC总数正常值：4000~10000/mm3）以上，应监测病情并停止给药。
• 禁忌 对本品及其成分过敏者禁用。
• 孕妇及哺乳期妇女用药 在孕妇及哺乳期妇女中安全性及有效性尚未报道，使用时应谨慎。
• 儿童用药 在儿童中安全性及有效性尚未报道，使用时应谨慎。
• 老年患者用药 在老年患者中安全性及有效性尚未报道，使用时应谨慎。
• 主要参考资料 [1] 顾翼东 主编.化学词典.上海：上海辞书出版社.1989.第803页 [2] 吕美光等. 脱氧核苷酸联合聚乙二醇化干扰素α-2a治疗慢性乙型病毒性肝炎合并肝功能异常的临床研究. 临床药物应用. 2016,6(5):100-103 [3] 赵朋娟等. 脱氧核苷酸与薄芝糖肽联合治疗对慢性中度乙型肝炎患者血清生化学的影响. 云南医药.2013,34(1):21-22. [4] 杨邦英 主编.罐头工业手册.北京：中国轻工业出版社.2002.第895-896页 [5] 脱氧核苷酸注射液说明书.
• 化学性质 本品为黄色或浅棕色的片状或粉末状物；吸湿性强。
• 能增进骨髓造血机能。临床用于治疗急慢性肝炎、白细胞减少症等。

医药

以鱼精蛋白为原料 分离核蛋白、提取、沉淀 取冷冻的鱼精蛋白10kg，搅碎，加水100L，加氯化钠至6%，聚氨酸钠1%，搅拌1-2min，加4倍量水，搅拌1-2min，将片状的脱氧核蛋白捞出，加132L水，5%SDS溶液518kg，搅拌溶液10-20min，离心，取上清液，加等量的预冷的95%乙醇，过滤，用乙醇、丙酮洗涤，干燥，得DNA。 鱼精蛋白[水、氯化钠]枸橼酸钠]→核蛋白[水、SDS]→[10-20min]滤液[95%乙醇]→[过滤]DNA 酶解、吸附、洗脱 500g DNA加10L蒸馏水搅拌溶解，冷库过夜，将 DNA黏稠液稀释至50L，90℃加热10min，使其变性，用盐酸调pH值5.4，加 5ml桔青酶发酵液，于72℃保温1.5h进行酶解，用氨水调pH值7，升温至90℃，加热10min，破坏5-磷酸二酯酶，并使蛋白变性，沉淀，冷库过夜，离心，除去蛋白，稀释1倍，调pH8.5，上717或711OH型树脂柱吸附，用蒸馏水洗涤至流出液为pH7，用0.2mol/L的盐酸液洗脱，pH2.5时开始收集，至 pH0.5为止。洗脱液用10mol/L氢氧化钠调pH7，冷库过夜。 DNA[磷酸二酯酶]→[pH5.4, 72℃]酶鲜液[氢氯化胺]→[pH7, 90℃]滤液[717树脂]→[pH8.5]吸附物[0.2mol/L盐酸]→[pH2.5-0.5]洗脱液 吸附、洗脱、浓缩、干燥 过滤除蛋白，滤液用盐酸调pH3.5，上769型活性炭柱，用柱体积2倍量的蒸馏水洗脱，再用乙醇、氨水洗脱(氨水：95%乙醇：蒸馏水=3：95：47)，洗脱液真空浓缩至糖浆状，在无水乙醇中脱水，研成粉末，真空干燥得混合脱氧核苷酸成品。 洗脱液[10mol/L氯化钠]→[pH7]滤液[活性炭]→[pH3.5]吸附物[乙醇、氨水]→洗脱液 制剂 按每毫升25mg溶于蒸馏水中，以10%氢氧化钠调pH6.5-7.5，加0.3%活性炭，放置15min，经硅藻土层抽滤，滤液纸浆过滤2次，加0.3%硫代硫酸钠，溶解后过滤，灌注2ml安瓿中，封口，100℃灭菌15min，得混合脱氧核苷酸注射液。 脱氧核苷酸[水、氢氧化钠、活性炭]→[pH6.5-7.5, 过滤]滤液[硫代硫酸钠]→滤液[分装、封口]→[无菌]脱氧核苷酸注射液。