131929-63-0 多杀霉素D
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用途与制备
农药
菌株 新微生物多杀菌多孢菌(Saccharo-polyspora spinosa)或能产生多杀菌素的突变株。在复合培养基和合成培养基上产生气生菌丝体。气生孢子群颜色主要为浅黄粉色,也有白色,反面为黄色至黄褐色,没有明显的色素沉着。 发酵培养 多杀菌素多孢菌的种子培养基为:酶解大豆水解液3%,酵母膏0.3%,MgSO4·H2O 0.2%,葡萄糖0.5%,麦芽糖.4%,去离子水1L,121℃下灭菌30min。接种量为10%。大规模生产时优选的碳源为葡萄糖和麦芽糖,也可使用核糖、木糖、果糖、半乳糖、甘露糖、甘露醇、可溶性淀粉、马铃薯糊精、油酸甲酯、油类等。优选的氮泊为棉子糖、胨化牛奶和消化大豆粉,也可使用鱼粉、玉米浸液、酵母膏、水解酪蛋白、牛肉膏等。掺入培养基中的无机盐有能产生下列离子的常规可溶性盐:锌离子、钠离子、镁离子、铵离子、氯离子、碳酸根离子、硫酸根离子、硝酸根离子等。此外,培养基中还应有微生物生长发育所需的必要微量元素。如有发泡问题,可在培养基中加入豆油抑制发泡。多杀菌素多孢菌的培养温度为24~33℃,产多杀菌素的最适温度为28~30℃。工业发酵时应通过通气量和搅拌速度来维持罐内溶解氧在60%以上,最好为65%以上。罐内压力为0.034MPa。 分离提取 经7~10d发酵后,加入等体积的丙酮,过滤除去菌体,滤液调节pH值至13,树脂吸附,用0~95%的甲醇:乙腈=1:1(含0.1%乙酸钠)溶液梯度洗脱多杀菌素A和D,分段收集洗脱液,得含多杀菌素洗脱液,浓缩获得多杀菌素浓缩液。将浓缩液用石油醚稀释,上硅胶色谱柱,用石油醚和甲醇梯度洗脱,分段收集,得多杀菌素A和D洗脱液。 分析检测 高效液相色谱仪(HPLC)。柱:ODS-AO,液动相:乙腈/甲醇/水=40/40/20(含0.05%乙酸铵),流速3mL/min,检则波长:250nm。