632-69-9 酸性红94

运输信息：常温运输。危险描述：非危险化学品（sinopharm_reagent）；危险品运输编号UN 3264 8 / PGIII，WGK Germany:3，RTECS号LM5920000，F:8，TSCA listed，海关编码32129000，存储类别11 - 可燃固体（chemicalbook）；RTECS号LM5920000，WGK Germany:3（molbase）。

作为分析试剂（银量滴定法吸附指示剂）、细菌染色剂、细胞染色剂；用于化学合成、材料科学、生命科学研究；在医药领域用于抗肿瘤和抗病毒综合征治疗；作为食用红色素用于樱桃、鱼糕、海带鱼肉卷、香肠、糕饼、鱼松等食品着色，用量5～100mg/kg。

分析试剂；细菌染色剂；银量滴定法的吸附指示剂；化学合成；材料科学；生命科学；医药（抗肿瘤和抗病毒综合征治疗）；食用色素（樱桃、鱼糕等食品着色）

路线1：重组TNFα的工艺过程

• 步骤1：细菌发酵
  • 工程菌接种于LB培养基，37℃震荡培养至A600nm=1，转至M9培养基，42℃诱导4h；
  • 离心收集菌体，用pH8的10mmol/L磷酸盐缓冲液（PB）悬浮，超声破碎后离心取上清，对PB透析得TNFα粗品。
• 步骤2：DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析
  • 离子交换柱用PB平衡，上样TNFα粗品，PB洗柱后用75mmol/L NaCl洗脱，收集活性峰得TNFα活性组分I。
• 步骤3：Q-Sepharose FF离子交换柱层析
  • 离子交换柱用pH8、20mmol/L Tris-HCl缓冲液平衡，上样TNFα活性组分I，用80mmol/L NaCl洗脱，收集活性峰得TNFα活性组分II。
• 步骤4：CM-Sepharose FF离子交换柱层析
  • 离子交换柱用pH6的10mmol/L PB平衡，上样TNFα活性组分II，依次用PB、200mmol/L NaCl、600mmol/L NaCl洗脱，收集600mmol/L NaCl洗脱峰（电泳单一条带）得TNFα纯品。

路线2：TNFα突变改造

• 步骤1：突变改造
  • 用多位点突变引物和PCR方法将TNFα基因第二位精氨酸密码子CGT突变为赖氨酸密码子AAA，得到突变基因TNF-K2。
• 步骤2：转化重组
  • 将TNF-K2插入载体pSB-92的PL启动子下游，转化E.coli JM103，酶切鉴定筛选重组质粒pSB-TNF-K2。
• 步骤3：培养诱导
  • pSB-TNF-K2于30℃培养至对数生长期，42℃诱导4h，获得突变体[Lys2]TNFα（分子量17kD，比活性6.8×10^7 U/mg蛋白，可溶性）。

注： 上述路线中“酸性红94”与TNFα相关制备信息存在数据混淆，可能为输入数据错误，实际酸性红94的合成方法应为：由四氯荧光素碘化后用氯化钠盐析而得（参照荧光桃红）。